稀释后的精液，采用逐渐降温法在1-1.5小时内，使稀释的精液温度降到4-5℃，然后在这个温度下静置平衡2-4小时。

细管冻精采用与细管配套的器具进行。颗粒冻精采用氟板、铜纱网、尼龙网或铝板均可。安瓿冻精采用净容量为0.5毫升的硅酸盐中性玻璃安瓿。以上各种用具，在冻精时，精液容器与液氮面的距离一般保持1-1.5厘米，初冻温度零下80-零下120℃。

精液在冷冻前，应充分混匀，并检查精子活力。细管精液不论是用聚乙醇、钢珠封口，还是超声波塑料热合，都必须将瓶口封严。颗粒精液，每毫升稀释精液滴冻10±1粒，滴管应事先预冷，与平衡温度一致。操作要准确，颗粒大小要均匀，每滴完一头公牛精液后，必须更换滴管、氟板等用具。安瓿精液，用酒精喷灯火焰封口。在制作冻精时，防止在操作过程中精液温度回升。每冻完一批（头）精液，应立即放入液氮中浸泡，并计数、取样检查和包装。

采后的精液经检查合格后，要尽快稀释。冷冻保存稀释液具有保护精于免受或减少冻害的作用。配制冻精用的稀释保护剂，必须用新鲜的双重蒸馏水和卵黄，二级品以上的化学试剂。所用器具必须清洁、无菌。稀释比例，按采得精液的密度和活力确定，以解冻后每个输精剂量所含的直线前进的精子数不低于标准要求。稀释保护荆应现配现用，或配后放入4-5℃冰箱中备用，但时间不应超过1周。

1.细管用稀释液保护剂。配方为：

液：蒸馏水100毫升，柠檬酸钠2.97克，卵黄10毫升。

第二液：取液41.75毫升，加入果糖2.5克，甘油7毫升。

或者使用：脱脂奶82毫升，卵黄10毫升，甘油8毫升。

2.颗粒用冻精稀释保护液。配方为：12%蔗糖液75毫升，卵黄20毫升，甘油5毫升。

或者用：12%乳糖液75毫升，卵黄20毫升，甘油5毫升。

或者用：2.9%柠檬酸钠液73毫升，卵黄20毫升，甘油7毫升。

上述各类稀释保护剂，在每100毫升中应加青霉素、链霉素各5-10万国际单位。

3.安瓿用冻精稀释保护液可参照以上各种配方酌情使用。